布鲁氏菌病及其防疫检测

2010-7-29 00:19| 发布者: admin| 查看: 2401| 评论: 0

摘要: 布鲁氏菌病及其防疫检测一．布氏杆菌病的介绍㈠．历史：1887年bruce 首次从布鲁氏牛的脾脏分离出马尔他热杆菌，1897年bang 和 stribolt又从牛的流产胎儿中分离出了流产本杆菌，并且作感染试验成功，1914年traum从猪的 ...

布鲁氏菌病及其防疫检测

一．布氏杆菌病的介绍

㈠．历史：1887年bruce 首次从布鲁氏牛的脾脏分离出马尔他热杆菌，1897年bang 和 stribolt又从牛的流产胎儿中分离出了流产本杆菌，并且作感染试验成功，1914年traum从猪的流产胎儿中分离出了这个菌，直到1920年，meyer 和 shaw才正式将这几个菌共同命名为布鲁氏菌。

布氏杆菌菌病（又名波状热，简称布病），是由布氏杆菌引起人畜共患的传染变态反应慢性传染病，主要侵害生殖道，引起子宫、胎膜、关节、睪丸及附睾的炎症；母牛临床发生胎衣停滞、流产及繁殖障碍，病理特征为全身弥漫性网状内皮细胞增生和肉芽肿结节形成。

因各种布氏杆菌对其相应种类的动物具有极高的致病性，并对其他种类的动物也有一定的致病力，牲畜患布病可造成大批流产，且能广泛流行，病原菌对人也有很高的致病性，人患布病可长期不愈，引起人发热、盗汗、无力、关节和头全身疼痛。布病通常是牲畜患病后传染给人，所以越是畜牧业发达国家疫情越重，故严重的危害着人民身体健康和畜牧业发展。因此，加强对本病的监测和控制，保证人、畜健康是极其重要的。

㈠．病原世界卫生组织目前将布鲁氏菌属分成六个种20个生物型。即羊种1-3生物型，牛种1-9生物型，猪种1-5生物型和犬种、沙林鼠种、绵羊副睾种各有1个生物型。在我国发现的主要为前三种，全国各省、区、市几乎都有不同程度的发生过布病疫情，但以北方各省为重。

1．形态布氏杆菌为细小的呈球形、短杆状、革兰氏染色阴性的杆菌。

2．培养布氏杆菌需要复杂的营养条件，初代分离必须在富含二氧化碳的有氧环境中生长繁殖。在平板培养基上呈蓝色、透明、有光泽、圆形菌落。

3．抵抗力布氏杆菌在体外生长条件复杂，一般来说，布氏杆菌喜欢潮湿、凉爽的环境，在感染的胎盘、胎儿组织、冰冻的牛奶和其他奶制品中，以及污染的冷水，都可长期具有感染性。布氏杆菌对热敏感，在湿热60℃15—30分钟，80℃ 7—19分钟，100℃1—4分钟即可死亡；阳光直射1小时死亡；在腐败病料中迅速失去活力；在尘埃中可活2个月，在皮毛中可活5个月。

一般常用消毒药都能很快将其杀死。如2-3%来苏尔、1—3%石炭酸、2%福尔马林、5%石灰水及0.1%升汞都可杀死本菌。

㈡．流行病学牛布病广泛的分布于世界各地，凡是养牛的地区都有不同程度的感染和流行，特别是饲养管理不良、防疫制度不健全的牛场，其感染更为严重。自然病例主要见于牛、山羊、绵羊和猪。母畜较公畜易感，成年家畜较幼畜易感。本病呈地方性流行。

1．传染来源布病牛是主要传染源。流产胎儿、胎衣、羊水及流产母牛的乳汁、阴道分泌物、血液、粪便、脏器及公牛的精液，皆含有大量病菌。

2．传播途径本病传播途径较多。但主要是经皮肤或粘膜接触、呼吸道吸入、经口食入三种途径传入。世界各国报告已有60多种动物可以带菌或传播布病，我国也发现10多种与人接触最密切的动物感染布病，如牛、羊、猪、鹿、犬、骆驼等。凡是与患布病牲畜、畜产品及其污染物接触，由于不注意防护和消毒，布氏菌均可通过破损的皮肤、粘膜、食道、呼吸道等途径感染到人体。当病菌污染了饲料、饮水或乳及乳制品中消毒不彻底，当牛采食了被污染的饲料后，经消化道感染；患病公牛与母畜交配，或因精液中含有病菌，通过人工输精经生殖道感染；病菌通过鼻腔、咽、眼黏膜，乳管上皮及擦伤的皮肤等，经呼吸道和皮肤黏膜感染。

3．促使传播的因素日粮不平衡，营养不良，卫生条件差，不消毒等皆可造成机体抵抗力的降低，增强机体的易感性。兽医在人工助产时、配种员在输精时消毒不严，可直接将本病扩散。

㈢．临床症状

主要症状是流产。流产多发生于妊娠5—8月份；流产儿可能死胎、弱犊。产犊后牛因胎衣不下、子宫内膜炎，致使配种不易受孕。此外，母牛可发生腕关节、跗关节及膝关节炎。

公牛睾丸受侵害，引起睾丸炎和附睾炎、坏死或化脓，精子生成障碍。新疫区常使大批妊娠母牛流产；老疫区流产减少，但关节炎、于宫内膜炎、胎衣不下、屡配不孕、睾丸炎等逐渐增多。

㈣．病理变化

1．剖检变化肉眼病变见于胎盘、乳房及流产儿。

流产儿：皮下呈浆液性或出血性浸润。胸腔积液并含纤维素块；胃肠浆膜、黏膜呈点状、线状出血；真胃内含黄色、白色黏液及纤维素絮状物；脾肿大。

乳房切面有黄色小结节。

胎膜：水肿并附有纤维素絮状物；绒我肥厚，糜烂。

睾丸、附睾、精囊结缔组织增生、坏死与化脓。

2．组织学变化

肉芽肿性病变在胎盘、子宫、睾丸、结巴结、脾脏等处有肉芽肿性变化，可见在结节的中心聚集圆形细胞，有时可见坏死和菌体，其周围是淋巴细胞，并杂有成纤维细胞。

胎盘炎绒毛膜和尿膜有坏死和水肿变化，在坏死见有嗜中性粒细胞浸润和菌体，呈坏死、化脓性炎。

乳房乳头管间质及腺泡间质有局限性淋巴细胞浸润和肉芽肿性病变；小叶间细胞增生，淋巴细胞和浆细胞浸润。

子宫黏膜上皮空泡化，固有膜有嗜中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞浸润，纤维性细胞增生，血管扩张，子宫腺体周围有细胞浸润或细胞崩解。

母牛的病变主要在子宫内部。在于宫绒毛膜间隙有污灰色或黄色无气味的胶样渗出物；绒毛虞乏皱毛有坏死病灶，表面覆以黄色坏死物或圬灰色脓液；胎膜因水肿而肥厚，呈胶样浸润，表面覆以纤维素和脓汁。流产的胎儿主要为败血症变化，脾与淋巴结肿大，肝脏中有坏死灶，肺常见支气管肺炎。流产之后母牛常继发子宫炎，子宫内膜充血、水肿，呈圬红色，有时还可见弥漫性红色斑纹，有时尚可见到局灶性坏死和溃疡；输卵管肿大，有时可见卵巢囊肿；严重时乳腺可因间质性炎而发生萎缩和硬化。公牛主要是化脓坏死性睾丸爽或跗皋炎。卑丸显著肿大，其被膜与外浆膜层粘连，切面可见到坏死灶或化脓灶。阴茎可以出现红肿，其黏膜上有时可见到小而硬的结节。

㈤．诊断

本病之流行特点、临惨症状和病理变化均无明显特征。流产是最重要的症状之一，流产后的子宫、胎儿和胎膜均有明显病变，因此确诊本病只有通过细菌学、血清学、变态反应等实验室手段。

㈥．治疗

目前尚无经济而有效的治疗药物。现有人认为可采取以下方法：

a) 长效土霉素2000mg ，稀释后分点于颈部皮下注射，结合使用硫酸链霉素，用量为20mg/kg体重，一次静脉注射。

b) 四环素2—3g ，一次内服，每日4次；链霉素1g，一次肌肉注射，连用3周。

c) 对流产后继续有子宫内膜炎的病牛可用1 %高锰酸钾冲洗子宫和阴道，每日1—2次，经2—3天后隔日1次，直至阴道分泌物流出为止。严重病例可用抗生素或磺胺类药物治疗。中药益母散对母牛效果良好，益母草30克、黄芩18克、川芎15克、当归15克、热地15克、白术15克、双花15克、连翘15克、白芍15克，共研细末，开水冲，候温服。

d) ㈦．预防

防治本病主要是保护健康牛群、消灭疫场的布氏杆菌病和培育健康幼畜三个方面，措施如下：

1．对健康牛群

①加强饲养管理根据不同生理阶段的营养需要，合理供应饲料。要注意供应矿物质、维生素饲料；搞好环境和牛棚的卫生，给牛提供良好的生活环境，提高奶牛的抵抗力。

②加强检疫，引种时检疫，引入后隔离观察一个月，确认健康后方能合群；每年定期用血液凝集反应检查1—2次，阳性牛应从牛群中隔离。

③定期预防注射，有的牛场在犊牛6月龄内时采取疫苗接种。疫苗有19号菌苗、猪布氏杆菌2号苗、羊布氏杆菌5号苗（使用见说明）。注射前应进行血检，阴性者可注苗；注射后1个月，血检，若血检阴性或可疑者，需进行第2次接种，直到阳性反应止。如布氏杆菌19号弱毒菌苗或冻干布氏杆菌羊5号弱毒菌苗可于成年母牛每年配种前1—2个月注射，免疫期1年；

④严格消毒，坚持常年防疫消毒制度，加强产房卫生，严格执行兽医、配种的消毒措施，减少感染机会。对临床流产应查找原因，对流产母牛应隔离饲养；取流产胎儿真胃内容物作细菌分离、鉴定。阴性者，母牛回牛群；阳性者，应从牛群中挑出，如头数少，可将其屠宰。对病牛圬染的圈舍、运动场、饲槽等用5％克辽林、5％来苏儿、10％一20%石灰乳或2％氢氧化钠等消毒；病牛用3％一5%来苏儿浸泡24小时后利用；乳汁煮沸消毒；粪便发酵处理，

2．培育健康幼畜，约占50％的隐性病牛，在隔离饲养条件下可经2—4年而自然痊愈；在奶牛场可用健康公牛的精液人工授精，犊牛出生后食母乳3—5天送犊牛隔离舍喂以消毒乳和健康乳；6个月后作间隔为5—6周的进行2次血液凝集反应检查，阴性者可进行布氏杆菌19号苗、猪2号或羊5号苗接种，然后再归入健康牛群；阳性者送人病牛群，从而达到逐步更新、净化牛场的目的。

3．对发病牛群

布病有自然康复和产生免疫的现象应加强饲养管理，饲料要丰富，品质要好，加强环境消毒，减少感染，促使自然痊愈。据报道，约经2年，可有40%—60%病牛痊愈。康复牛的标准是2次凝集反应、2次补体结合反应全为阴性，并有一次正产。

二．乳牛布氏杆菌病检疫的操作规程

㈠．血样采取事项的具体要求：

1．采血部位：在乳牛尾静脉或颈静脉进行。

2．采血器要求：必须用消毒过的一次性采血器进行采血，并且每根采血器，只能单独使用于某头牛。

3．采血量要求：每头牛只的采血量为1.5-2.0ml。

4．血样存放要求：每头牛只血样立状放置。

5．夏天在5-8℃下保存，不得冷冻；冬天在15℃以下时，室温存放即可，要防止冷冻。

6．血样送检的要求：必须在采血当天或次日早晨送往指定化验点，过期及溶血的血样应重采。

7．牛号标识要求：在正常情况下，每次分批采血样时不得重复采取同一牛号，标签必须贴牢，牛号数字必须写得工整、清楚、不得省略。每个牛舍采血后，必须将牛号与血样标识核对清楚，一致后才能送检，遇重号、空号等差错，必须废弃后重采。

8．送检牛血总的要求：必须写清楚牧场名称、采样日期、采样头数、采样牛号等。

㈡．检测方法

1．试管凝集试验

⑴．材料准备：稀释液（0.5%石炭酸生理盐水）、抗原、阳性标准血清、阴性标准血清、凝集试验管（三分管）、定量加液器、微量移液器、试管架、吸管及温箱等。

⑵．方法：按常规方法分离血清，每份血清用4支试管，第一管加0.5%石炭酸生理盐水2.4ml，第2-4管各加0.5ml；用移液器吸被检血清0.1ml于第一管，将血清和石炭酸生理盐水混和（混匀方法是在原试管中，以吸管吸吹三四次），吸出2ml，弃去1.5ml，0.5ml加入第二管混和，吸取0.5ml加入第三管混和；吸取0.5ml加入第四管混和，吸取0.5ml弃去不要。稀释结果，从第一管起至第四管的稀释度分别为1：25、1：50、1：100、1：200，各稀释度的容积均为0.5ml。稀释完毕后，用石炭酸生理盐水将抗原作1：20稀释，在1-4每管各加入抗原稀释液0.5ml，加入抗原后，从第1-4管的血清稀释度依次为1：50、1：100、1：200、1：400。