温六吉 白小明 蔡小平 张百锁 安庆伍 张永祥 朱明轩 (甘肃省清水县畜牧兽医工作站,甘肃清水 741400) 家畜胚胎移植又称受精卵移植,是生物工程技术的组成部分,目前胚胎移植技术已逐步从实验室走向试验推广阶段,商业化推广以黄牛胚胎移植为主。本试验利用黄牛胚胎移植技术,用氯前列烯醇(ICI 80996)对120头母牛进行同期发情处理,注射1次有效率达76.67% ,注射2次有效率达90.00% ,其效果与等量的15甲基PGF2α相比差异显著(P< 0.05),大大地提高了工作效率,缩短了移植时间,便于母牛的后期管理。 1 材料与方法 1.1 试验动物选择本县草川铺乡临床健康、无繁殖疾病、营养状况良好的3~9岁龄西杂母牛240头,随机分为4组,每组60头。A组牛注射氯前列烯醇1次;B组牛注射氯前列烯醇后间隔11d再重复注射1次;C组牛注射15甲基PGF2α;D组牛为对照组。试验期为3个情期。 1.2 药物和胚胎 氯前列烯醇;由上海市计划生育科学研究所生产.批号000513;15甲基PGF2α;上海五洲制药厂生产,批号990312;胚胎;选用北京育生爱德公司体外冷冻胚胎,品种为海福特肉牛,胚龄8 d。 1.3 方法 1.3.1 A组给每头牛注射氯前列烯醇4 ml,发情排卵8 d后,检查黄体合格者进行胚胎移植。 1.3.2 B组与A组同时给每头牛注射氯前列烯醇4 ml,l1 d后再注射该药4 ml,观察发情状况,发情排卵8 d后检查黄体合格者进行胚胎移植。 1.3.3 C组给每头牛注射15甲基PGF2α4 ml,观察发情状况,发情排卵8 d后检查黄体合格者进行胚胎移植。 1.3.4 D组牛不做任何处理,任其自然发情,按试验组给药时间8 d后检查黄体合格者进行胚胎移植。 2 结果和分析 2.1 A、B两试验组牛注射氯前列烯醇,3~8 d其发情率均为76.67% ,B组牛第2次注射该药后发情率提高到90.00% ,其作用比等量15甲基PGF2α高出33.33个百分点,同比效果差异极显著(P< 0.01),结果见表1。 表1 不同激素对母牛处理效果 组别牛数(头)发情数(头)不发情数(头)同期发情率% A60461476.67 B6054690.00 C60342656.67 D60194131.67 2.2 B组黄体检查合格率和移植受胎率都比A、C组高,但比D组低,结果见表2。 表2 各组黄体合格率和移植受胎率比较 组别发情数(头)黄体合格数(头)黄体合格率%受胎数(头)移植受胎率%同期妊娠率% A462145.65733.3311.70 B543361.111339.3921.67 C341852.94633.3310.00 D191578.94640.00 注:A B C 组为1个情期,D组为3个情期 由表1、表2可以看出,注射氯前列烯醇试验牛同期发情效果较等量的15甲基PGF2α好,2次注射氯前列烯醇比1次注射的同期发情反应率、黄体合格率、移植受胎率、同期妊娠率都有明显提高;对照组牛的黄体合格率和移植受胎率虽然均明显高于前列腺素类药物(PG)处理的A、B、C组,但其耗时长(3个情期,PG处理为1个情期)、发情率低、同期化程度低。因此,2次注射氯前列烯醇对母牛的发情控制效果明显高于其他激素和方法,可在各类动物繁殖技术中推广应用。 3 讨论 3.1 前列腺素类药物用于同期发情主要是利用其溶解黄体的作用,溶解黄体的机理目前有两种观点:一种是直接作用于黄体,抑制孕酮的合成;另一种是收缩血管平滑肌,显著降低子宫卵巢的血流,导致卵巢局部缺血缺氧,抑制孕酮合成,从而导致黄体溶解。通过多年临床试验,笔者认为后一种观点较好地解释了前列腺素类药物溶解黄体的机理。该类药物具有使用简便、安全、剂量小、效果明显(同期发情率和受胎率都较高)的优点,因此是目前普遍推广使用的同期发情药物。 3.2 用氯前列烯醇和15甲基PGF2α对母牛做同期发情试验比较,结果显示,2次注射氯前列烯醇可使体外冷冻胚胎移植成功率提高;但氯前列烯醇和15甲基PGF2α均能不同程度地诱发卵巢囊肿现象(如卵巢肿大、发热),其机理目前尚不清楚,而2次注射氯前列烯醇,可以改善这种现象,使黄体合格率明显升高。 3.3 生物繁殖技术(包括胚胎移植及其延伸技术)都需要用激素来达到发情同期化的目的,以利于生物繁殖控制。但目前应用的各种方法虽然同期化程度高,但黄体合格率、同期妊娠率均较低,而胚胎移植需要大面积推广应用,因此对这一问题的解决,还需要诸多学科的通力配合和深入研究。 |