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头孢噻呋等抗菌20药物对4种标准菌株的药效学研究

2010-7-29 01:29| 发布者: admin| 查看: 1877| 评论: 0

摘要: 头孢噻呋等抗菌20药物对4种标准菌株的药效学研究王付民, 胡功政, 高延玲(河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002)摘 要:通过用头孢噻呋等抗菌药物对兽医临床常见的4种标准菌株的体外抗菌活性的研究,表明头孢噻 ...
 

头孢噻呋等抗菌20药物对4种标准菌株的药效学研究

王付民, 胡功政, 高延玲

(河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002

通过用头孢噻呋等抗菌药物对兽医临床常见的4种标准菌株的体外抗菌活性的研究,表明头孢噻呋等对4种标准菌株的抗菌活性较强;头孢噻呋等对4种标准菌株的杀菌速率均较大;与氨苄西林相比,头孢噻呋的各个浓度(852 MIC)对金黄色葡萄球菌、猪链球菌的杀菌速率较小,即它们在3 h内使活菌减少的值差异显著(P<0.05),但头孢噻呋的各个浓度(852 MIC)对鸡大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌的杀菌速率均大于氨苄西林的各个浓度;头孢噻呋与头孢曲松的各个浓度相比较,对4种标准菌株的杀菌速率差异均不显著(P>0.05);头孢噻呋等3种β内酰胺类抗生素对4种菌株的杀菌速率均不随浓度(852 MIC)的增加而增大(P>0.05),即它们均为非浓度依赖性的杀菌药物。?

关键词: 头孢噻呋;4种标准菌株;抗菌活性;杀菌曲线。?

头孢噻呋(Ceftiofur)作为第一个动物专用的第3代头孢菌素类抗生素,其抗菌谱广、抗菌活性强,国外应用较早并对其药效学及药动学进行了大量研究[1-3],但在国内尚未见对该药的体外抗菌活性、杀菌动力学曲线方面的系统研究。随着我国的仿制成功和批准生产,该药在国内的应用必将日趋广泛。因此,结合我国兽医临床常见病原菌进行头孢噻呋的药效学研究,对其更为合理的防治畜禽细菌性疾病,显得尤为重要。?

1 材料与方法?

1.1 材料?

1.1.1 药品 头孢噻呋原粉:美国法玛西亚普强公司生产,纯度为95.8%,批号为020406;头孢曲松原粉:广州白云山制药总厂生产,纯度为94.8%,批号为010860;氨苄西林原粉:河北远征药业有限公司生产,纯度为85%,批号为002405。?

1.1.2 试剂 营养肉汤培养基,杭州天河微生物试剂有限公司生产;麦康凯营养琼脂,杭州天河微生物试剂有限公司生产;SS营养琼脂,杭州天河微生物试剂有限公司生产;血琼脂平板,郑州博赛生物技术研究所生产;卵黄高盐琼脂,杭州天河微生物试剂有限公司生产。1.13 仪器 SW-CJ-JC型超静工作台,苏静集团苏州安泰空气技术有限公司;全自动电子分析天平,北京赛多利斯仪器系统有限公司生产。?

1.1.4 鸡大肠杆菌O78、鸡白痢沙门氏菌C79-13、金黄色葡萄球菌C56000、猪兽疫链球菌C?55138菌种,均来源于中国兽医药品监察所。?

1.2 方法?

1.2.1 菌种的启封与培养 取各细菌冻干标准菌株管,无菌启封后分别接种于营养肉汤(猪链球菌使用50 mL/L小牛血清的营养肉汤)中,于37 ℃培养12 h,然后触片、革兰氏染色、镜检,同时进行平板划线,观察各菌的菌落形态。鸡大肠杆菌在镜下为小的杆状的G-细菌,麦康凯营养琼脂平板上为紫红色的直径约1 mm左右的圆形小菌落;鸡白痢沙门氏菌在镜下为小的杆状的G-细菌,SS营养琼脂平板上为无色的针尖状的小菌落;猪链球菌在镜下为链状或单个存在的G+球菌,在血琼脂平板上呈β型溶血;金黄色葡萄球菌在镜下为葡萄状的G+球菌,在普通营养琼脂平板上为金黄色的圆形菌落,在卵黄高盐琼脂上为黑色菌落。培养时分别钩取平板上1个~2个菌落接种于营养肉汤中,37 ℃培养18 h24 h后,4 ℃冰?箱保存。

1.2.2 药液配制 体外抑菌试验的药液配制。无菌准确称取适量的各种药物,用无菌蒸馏?

配制成浓度为1 280 mg/L的药液100 mL,均为使用前配制;测杀菌动力学曲线的药液配制。如上述方法配制800,500200 MIC的各种药液。?

1.2.3 体外抑菌试验 采用试管两倍稀释法,细菌浊度为105 cfu/mL,以37 ℃培养18 h24 h后能抑制细菌生长的最小药物浓度为最小抑制浓度(MIC),继续培养到48 h能抑制细菌生长的最小药物浓度为最小杀菌浓度(MBC)。相同过程重复3次,求平均值[4]。?

1.2.4 细菌计数 9 g/L的无菌生理盐水作为细菌记数的稀释液,对菌液进行10倍比系列稀释后,取104108的稀释度的稀释液0.1 mL置于平板上均匀涂布,每个稀释度2个~3个平板,在37 ℃培养18 h24 h后,对细菌数在30个~300个的平板进行计数,求平均值,以cfu/mL为单位。?

1.2.5 对数生长期细菌悬液的制作 将菌种接种于新鲜的营养肉汤中,37 ℃培养18 h24 h,然后划线,与 37 培养18 h24 h,取平板上1个~2个菌落接种于营养肉汤中,37 ℃培养8 h10 h,使活菌数在108 cfu/mL,使用时根据需要以37 ℃预温的营养肉汤稀释到所需的浊度。?

1.2.6 杀菌动力学曲线的测定 0.1 mL800,500200 MIC的各种药液0.1 mL,分别加入8.9 mL37 ℃预温的营养肉汤中,混匀后取108cfu/mL对数生长期细菌悬液1 mL加入该肉汤中,立即置37 ℃恒温水浴培养,然后分别于0,0.5,1,1.5,2,3,4,5,6 h8 h0.1 mL的菌液进行细菌计数。相同过程重复3次,求平均值。将细菌计数所取的各个时间点cfu/mL值取常用对数(log10)以其为纵轴,以孵育时间为横轴建立各抗菌药物在不同浓度、对不同细菌的杀菌动力学曲线,并比较不同细菌在不同药物及不同药物浓度中3 h内细菌减少的数目的对数值,了解各药物在不同浓度的杀菌活性与杀菌速率。?

2 结果?

2.1 对4种标准菌株的抗菌活性?

头孢噻呋、头孢曲松、氨苄西林对4种标准菌株的抗菌活性(表1)。头孢噻呋对4种标准菌株均有较强的抗菌活性,头孢噻呋对鸡大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌的抗菌活性强于氨苄西林,但弱于头孢曲松;对金黄色葡萄球菌、猪链球菌的抗菌活性弱于氨苄西林,但强于头孢曲松。

1 头孢噻呋等对4种标准菌株的抗菌活性?

Table 1 Antimicrobial activity of ceftiofur and other antibiotics tested against four standard strainsmg/L?


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