荷斯坦奶牛酮病对抗氧化系统影响的研究

摘要：为了探讨酮病对抗氧化系统的影响，以荷斯坦奶牛为实验动物，应用酮粉法和改良式水杨醛比色法随机检测结果，一组为10头阳性牛，另一组为10头对照牛。应用DTNB显色法测定血清中GSH-Px活力，应用黄嘌呤氧化法测定血清中T-SOD活力，应用硫代巴比妥酸法测定血清中MDA含量。结果表明,酮病奶牛血清中GSH-Px活力极显著降低 (P<0.01)、 T-SOD活力显著降低(P<0.05)，血清中MDA含量显著增高(P<0.05)。因此酮病影响奶牛抗氧化系统，这一结论对揭示奶牛酮病的发生机理具有重要的意义。

关键字：酮病；谷胱甘肽过氧化物酶；总超氧化物岐化酶；丙二醛；菏斯坦奶牛

目前，我国奶牛酮病发病率显著增高，尤其是隐性酮病，降低奶产量，影响奶质量，给奶牛业发展带来了重大的经济损失^[1]。奶牛酮病是高产奶牛产犊后6周内最常发生的一种以碳水化合物和挥发性脂酸代谢紊乱为基础的营养代谢病。临床表现为顽固性消化紊乱，呼出气有酮味，产乳量下降，机体脱水和一定的神经症状。临床特征为酮血、酮尿、酮乳、低血糖、血浆游离脂肪酸浓度升高和肝糖含量降低^[2]。为了进一步揭示奶牛酮病的发生机理，我们首次研究奶牛酮病对抗氧化系统的影响，旨在为临床防治奶牛酮病提供实验依据。

1  材料和方法?

1.1 材料?

1.1.1实验动物黑龙江某奶牛场泌乳量在6 500 kg以上的3胎～6胎荷斯坦奶牛。?

1.1.2仪器7230分光光度计,上海第三分析仪器厂；低速台式离心机，上海安亭科学仪器厂；旋涡混匀器， 上海第一医学院仪器厂。?

1.1.3试剂谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性测定试剂盒、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性测定试剂盒、丙二醛（MDA）含量测定试剂盒由南京建成生物工程研究所生产；亚硝基铁氰化钠，无水碳酸钠，硫酸铵（分析纯），由天津市化学试剂一厂生产。?

1.2 方法?

1.2.1试验动物处理应用酮粉法^[3] 和改良式水杨醛比色法^[4] 对某农场的荷斯坦奶牛进行酮病抽样检测。分为2组，每组10头，分别为对照组和阳性组。对实验动物尾中动脉采血5 mL，分离血清，冷冻保存，在最短时间内测定试验指标。1.2.2血清GSH-Px活性测定采用常规的DTNB显色法测定。?

1.2.3血清T-SOD活性测定采用常规的黄嘌呤氧化法测定。?

1.2.4血清MDA含量测定采用常规的硫代巴比妥酸法测定。?

1.2.5数据处理采用常规的用Excel软件处理。?

2  结果?

2.1 酮病阳性牛的诊断结果?

2.1.1酮粉法诊断结果有紫色迹象，并逐渐加深，于30 s达顶点者为（++++），约含酮体4.0 mg/L以上（图1）。?

2.1.2改良式水杨醛比色法诊断结果对照组奶牛血清酮体含量0.3 mg/L，阳性组奶牛血清酮体含量5.6 mg/L。?

2.2 血清GSH-Px、T-SOD活力及MDA含量测定结果?

从表1可见，阳性组与对照组相比，血清中GSH-Px活性极显著降低﹙P<0.01﹚，对照组的T-SOD活力显著大于阳性组（P<0.05），阳性组的MDA含量显著大于对照组（P<0.05）。?

3  讨论?

酮病的发生机理现在普遍接受的学说是糖缺乏理论。由于各种原因所致碳水化合物供应不足以及高泌乳消耗大量的糖，导致机体低血糖及能量负平衡。为此，动用机体的脂肪和蛋白补充能量的不足。

图1酮粉法测定结果?

Fig.1Determination results of ketosis

表1各组试验血清中GSH-Px、T-SOD活力及MDA含量测定结果?

Table 1Determination Results of  GSH-Px , T-SOD Activity  and MDA Contents  in Serum in  Holstein Dairy Cows?